¿Qué es la tecnología de edición de genes ngago publicada por el equipo de Han Chunyu en "Nature Biotech"? ¿Cuál es el avance?
La tecnología NgAgo-gDNA es una tecnología de edición de genes que utiliza el ADN como herramienta de orientación. El principio de funcionamiento de la tecnología NgAgo-gDNA es algo similar al de la tecnología CRISPR-Cas9. Bajo la guía de la herramienta de guía, la nucleasa corta la secuencia del gen en un sitio específico para realizar la edición de genes. La diferencia es que la herramienta de guía utilizada en la tecnología NgAgo-gDNA es un ADN guía (gDNA) en lugar de ARN en la tecnología CRISPR-Cas9. Dado que no es necesario utilizar proteínas (como las proteínas con dedos de zinc) para encontrar secuencias que deban ser reemplazadas, la tecnología NgAgo-gDNA, como la tecnología CRISPR-Cas9, es mucho más simple y conveniente de operar que las tecnologías de edición de genes anteriores, que es beneficioso para su uso en aplicaciones.
La nucleasa utilizada en la tecnología NgAgo-gDNA es NgAgo, una proteína endonucleasa Ago que se encuentra en Natronobacterium gregoryi. Los científicos holandeses descubrieron originalmente que la hace nucleasa puede utilizar eficazmente ADN monocatenario como medio corto para escindir objetivos genómicos con relativa precisión. La limitación de la investigación inicial fue que la temperatura requerida para el experimento era de 65 a 75 grados Celsius, que no se podía completar en condiciones fisiológicas. A través de búsquedas continuas por parte del equipo del profesor Han Chunyu, finalmente descubrieron que la proteína homóloga Ago de Halobacterium gastrophila puede lograr funciones similares en condiciones fisiológicas.
La tecnología NgAgo-gDNA puede tener más ventajas que la tecnología CRISPR-Cas9. En comparación con la tecnología CRISPR-Cas9, la tecnología NgAgo-gDNA tiene una selección más amplia de sitios de destino que se pueden editar. Debido a que Cas9 necesita emparejarse con 19 bases en el genoma y requiere una secuencia específica de tres bases (secuencia PAM) inmediatamente después de este conjunto de bases, limita la selección de sitios objetivo hasta cierto punto, y la tecnología NgAgo-gDNA La selección de el sitio objetivo no está limitado por la secuencia PAM y los objetos de edición están menos restringidos y pueden editar casi cualquier posición en el genoma.
Además, la longitud del ADNg unido a NgAgo es de 24 bases, que es 5 bases más larga que las 19 bases del ARNg unido a Cas9. En teoría, su precisión debería mejorarse 1024 (4 5.ª potencia). . Y la investigación del equipo de Han Chunyu también encontró que, en comparación con CRISPR-Cas9, el sistema NgAgo-gDNA tiene una tolerancia muy baja a los desajustes entre la secuencia guía y la secuencia objetivo. La precisión de la edición es mayor y puede evitar de manera más efectiva fenómenos fuera del objetivo.