Datos detallados sobre TnI y TnT séricas
Descripción general, alias, examen médico, nombre del examen, clasificación, materiales de examen, principios, reactivos, métodos operativos, valores normales, importancia de los resultados del examen, enfermedades relacionadas, descripción general La troponina es una proteína reguladora de la contracción muscular. compuesto por tres subunidades estructuralmente diferentes, a saber, troponina T (TnT), troponina I (TnI) y troponina C (TnC). TnI se une a la actina en reposo e inhibe la actividad ATPasa de la actina. TnC tiene cuatro sitios de unión que pueden unir iones de calcio. Cuando se une a iones de calcio intracelulares, puede provocar cambios estructurales en toda la proteína troponina. La troponina relaja la actina y permite que la actina interactúe con la miosina, provocando la contracción muscular. Hay tres isómeros de la troponina, dos de los cuales son específicos del músculo esquelético y uno del músculo cardíaco. Existen diferencias estructurales entre los tres isómeros de la troponina. La estructura de las subunidades T e I en el músculo cardíaco es diferente a la de otros tejidos musculares. Debido al pequeño peso molecular, las troponinas T e I cardíacas (CTnT y CTnI) son 37000D y 24000D respectivamente, y la concentración plasmática aumenta rápidamente después del inicio de la enfermedad. Se han obtenido antisueros específicos contra CTnT y CTnI. La inmunocromatografía y el inmunoensayo enzimático se pueden utilizar para una detección rápida y una determinación cuantitativa, que son rápidas, sensibles y específicas. Alias TnI; TnT Nombre de la prueba médica Clasificación de TnI y TnT en suero Prueba bioquímica en sangre> Principio de extracción de sangre para proteínas (1) Detección rápida de troponina T e I cardíaca: antígenos específicos (CTnT, CTnI) en la muestra mediante el método de inmunocromatografía. determinación. Durante la detección, la muestra de suero se deja caer en el tanque de muestra y la muestra se mueve a lo largo de la membrana del papel de prueba mediante acción capilar. Si la muestra contiene un antígeno específico y aparece una banda de color en el área de detección, debe haber otra banda de color en el área de control como control experimental. (2) Determinación de troponina T cardíaca mediante ELISA: ELISA sándwich de doble anticuerpo está recubierto con un anticuerpo monoclonal anti-TnT biotinilado con estreptavidina bajo la acción de biotina y avidina. El antígeno TnT reacciona con el anticuerpo monoclonal TnT marcado con enzima en secuencia. y luego se añaden los cebadores. La enzima cataliza el desarrollo del color del sustrato y el contenido de CTnT se determina cuantitativamente mediante una curva estándar desarrollada por una serie de estándares de TnT. Reactivos de detección rápida (1) Troponina T e I cardíaca: tira reactiva inmunocromatográfica CTnT (patentada por DeBau Guolingman Company). Tiras reactivas para inmunocromatografía CTnI (importadas). (2) Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzima para determinar la troponina T cardíaca: ① Placa recubierta con anticuerpo monoclonal CTnT de biotina-avidina. ②Tampón de incubación. ③Líquido de lavado concentrado. ④Conjugados marcados con enzimas. ⑤Estándar CTnT. ⑥Fuente original: ABTS (diamino 2,2 azida). Método de operación (1) Detección rápida de troponina cardíaca T e I: ①Abra el papel de embalaje y marque el número de muestra. ②Agregue de 5 a 6 gotas de muestra de suero en el tanque de muestra. ③Observe la apariencia de la cinta dentro de 10 a 15 minutos. Nota: ① El papel de prueba solo se puede usar una vez y no es válido para uso repetido. ② No hay una banda de color en el área de prueba y en el área de control del papel de prueba. Si la prueba se repite con otro papel de prueba y no hay resultado, el papel de prueba no es válido. ③ La determinación inmunocromatográfica de CTnT y CTnI es adecuada para la detección rápida junto a la cama, pero solo se requiere una medición cualitativa o semicuantitativa para comprender verdaderamente la gravedad de la enfermedad y seleccionar las medidas de tratamiento. (2) Determinación de la troponina T cardíaca mediante ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas: ① Agregue suero estándar, suero de control y muestras del paciente a los pocillos correspondientes, de 50 µl cada uno. ②Agregue 50 µl de tampón de incubación a cada pocillo y mezcle suavemente. ③ Incubar a temperatura ambiente durante 60 minutos y lavar tres veces, completando en 10 minutos. Golpee vigorosamente los microporos sobre el papel absorbente. para eliminar las gotas de agua residuales. ④Agregue 100 µl de conjugado enzimático a cada pocillo y mezcle suavemente. ⑤ Vacíe la solución de incubación en la microplaca, enjuague los micropocillos tres veces con una solución limpiadora y golpee vigorosamente los micropocillos sobre papel absorbente para eliminar las gotas de agua residuales. ⑥Añadir 200 μl de solución de sustrato cromogénico en el pocillo correspondiente, proteger de la luz, agitar suavemente y dejar reposar durante 30 minutos. ⑦ Dentro de 65438±00 minutos, utilice un lector de microplacas para medir el valor de absorbancia (valor OD) en las longitudes de onda duales de 405 nm y 630 nm.
Nota: ① Es mejor utilizar suero en lugar de plasma anticoagulado para probar CTNT, porque los anticoagulantes como la heparina y el EDTA tienen un impacto en CTnT. ② Debido a la liberación de CTnT debido al daño de las células del miocardio, se debe evitar en la medida de lo posible la hemólisis de la muestra. Los resultados de la prueba pueden mejorar si la muestra se hemoliza. ③La solución de incubación preparada debe almacenarse entre 2 y 8 ℃ y no puede congelarse. ④Antes del experimento, preste atención a si el reactivo ha caducado. Si se echa a perder, el color se intensificará. ⑤ Para mejorar la confiabilidad de la detección CTnT, se debe prestar atención a la precisión de la adición de muestras y otras operaciones. Es mejor elegir longitudes de onda duales para el análisis colorimétrico. Método seco normal: inmunoensayo negativo para TnI: TNT 0 ~ 0,1,5 μ g/l. La importancia de los resultados de la prueba aumenta: lesión isquémica del miocardio, como infarto de miocardio, angina aguda, angina inestable, después de una cirugía cardíaca, etc. Después de una lesión miocárdica, la TnI y la TnT aparecen primero en la sangre y duran mucho tiempo. Por lo tanto, la TnI y la TnT son indicadores más específicos y sensibles de lesión miocárdica, y la TnI es más sensible que la TnT. (1) En el infarto agudo de miocardio, la concentración sanguínea del fármaco aumenta rápidamente después del inicio de GTnT y CTnI exceden el límite superior del valor de referencia entre 3 y 6 horas, alcanzan el máximo entre 10 y 24 horas para GTNT y vuelven a la normalidad. en 10 a 15 días. Ctni alcanza su punto máximo en 1,4 a 20 h y vuelve a la normalidad en 5 a 7 días. Es decir, aparece tempranamente, igual o antes que la CK-MB, desaparece lentamente y dura más que la LD1. El período ventana para el diagnóstico es particularmente largo y tiene las ventajas tanto de la CK-MB como de la LD1. La sensibilidad de GTnT es de 50 ~ 59 (0 ~ 6 h), y la de CTnI es de 6 ~ 44. La especificidad de GTnT es 74 ~ 96 y la de CTnI es 93 ~ 99. Se ha informado que GTnT es más sensible que CK-MB en el diagnóstico de IAM, pero se ha informado que GTnT está presente en muestras de sangre de pacientes con enfermedad renal, lo que lo hace menos específico. GTnT es más sensible que LD1/LD2 en el diagnóstico de IAM. CTnI no se encuentra en la sangre de pacientes con enfermedad renal y otras enfermedades, por lo que CTnI es el único marcador específico de daño cardíaco. Debido a que GTnT y CTnI desaparecen lentamente, pueden usarse como marcadores de infarto de miocardio tardío. (2) GTnT y CTnI se pueden utilizar como indicadores de síntomas de infarto de miocardio durante la cirugía cardíaca. Cuando un paciente se somete a una cirugía de bypass arterial, si los niveles de GTnT y CTnI aumentan, indica un infarto de miocardio, pero el nivel de CK-MB no cambia en este momento. Enfermedades relacionadas con el infarto agudo de miocardio