¿Cuáles son las funciones del etanol absoluto y del etanol 70 en la preparación de ADN plasmídico?
Después de eliminar el precipitado de proteínas, añadir etanol absoluto para precipitar el plásmido, centrifugar para eliminar el sobrenadante, después añadir etanol al 70% para limpiar el precipitado de ADN y lavar dos veces. Finalmente, el sedimento de ADN debe disolverse en te o ddH2O.
Datos ampliados:
1. Mida el volumen de la solución de ADN, agregue con precisión CsCl sólido en una dosis de 1 g/ml y caliente la solución a 30 °C para ayudar a disolver. él. Revuelve suavemente la solución hasta que la sal se disuelva.
2. Agregue 0,8 ml de solución de bromuro de etidio (10 mg/ml disueltos en agua) a cada 10 ml de solución de ADN; mezcle inmediatamente la solución de bromuro de etidio (flotando en la superficie) con la solución de ADN-cloruro de cesio; mezcla. La densidad final de la solución debe ser de 1,55 g/ml (el índice de refracción de la solución es 1,3860) y la concentración de bromuro de etidio debe ser de aproximadamente 740 μg/ml. Las soluciones de almacenamiento de bromuro de etidio deben almacenarse en recipientes a prueba de luz (como botellas completamente envueltas en papel de aluminio) a temperatura ambiente.
Enciclopedia Baidu-Purificación de ADN plasmídico