¿Cuáles son las funciones del etanol absoluto y del etanol 70 en la preparación de ADN plasmídico?

En la preparación de ADN plasmídico, el etanol absoluto puede precipitar el ADN y luego concentrarlo. Lavar el ADN con etanol al 70% para eliminar aún más las impurezas.

Después de eliminar el precipitado de proteínas, añadir etanol absoluto para precipitar el plásmido, centrifugar para eliminar el sobrenadante, después añadir etanol al 70% para limpiar el precipitado de ADN y lavar dos veces. Finalmente, el sedimento de ADN debe disolverse en te o ddH2O.

Datos ampliados:

1. Mida el volumen de la solución de ADN, agregue con precisión CsCl sólido en una dosis de 1 g/ml y caliente la solución a 30 °C para ayudar a disolver. él. Revuelve suavemente la solución hasta que la sal se disuelva.

2. Agregue 0,8 ml de solución de bromuro de etidio (10 mg/ml disueltos en agua) a cada 10 ml de solución de ADN; mezcle inmediatamente la solución de bromuro de etidio (flotando en la superficie) con la solución de ADN-cloruro de cesio; mezcla. La densidad final de la solución debe ser de 1,55 g/ml (el índice de refracción de la solución es 1,3860) y la concentración de bromuro de etidio debe ser de aproximadamente 740 μg/ml. Las soluciones de almacenamiento de bromuro de etidio deben almacenarse en recipientes a prueba de luz (como botellas completamente envueltas en papel de aluminio) a temperatura ambiente.

Enciclopedia Baidu-Purificación de ADN plasmídico