Bibliografía sobre principios y tecnología de ingeniería genética
1. Concepto y pasos básicos de la ingeniería genética 1
2. Desarrollo de la tecnología de ingeniería genética 2
3. 5
Capítulo 2 Genes y regulación de la expresión génica 7
Sección 1 Estructura y función de los genes 7
1 Base molecular de los genes 7
2. Estructura básica de los genes estructurales 8
3. Estructura genética y modelo regulador de procariotas 8
IV. Estructura y modelo regulador de genes eucarióticos 9
Verbo (abreviatura de verbo) un gen con estructura y función especial 11
p>Sección 2: Estructura y función del genoma 13
1. Características estructurales y funcionales del genoma viral 13
2. Características estructurales y funcionales del genoma procariótico 14
p>
p>
Tres. Características estructurales y funcionales de los genomas eucariotas 15
IV. Genoma mitocondrial 15
Verbo (abreviatura de verbo) Genoma humano 16
Sección 3 Expresión y regulación de genes 17
Principio (básico) de regulación de la expresión genética. 18
2. Regulación de la expresión génica en procariotas 20
III. Regulación de la expresión génica en eucariotas 24
Resumen del capítulo 29
Pregunta de reflexión 30
Capítulo 3 Aislamiento y análisis de ácidos nucleicos
Sección 1: Aislamiento y purificación de ácido nucleico 31
1. Principios y requisitos para el aislamiento y la extracción de ácido nucleico 31
2 Pasos principales de la extracción de ácido nucleico 31
tres. Aislamiento y purificación de ADN plasmídico 33
IV. Preparación de ADN genómico 35
Verbo (abreviatura de verbo) Extracción de ARN 35
Verbo intransitivo Cuantificación de ácidos nucleicos 36
Sección 2 Condensación de ácidos nucleicos 37 Gel electroforesis
1. Electroforesis en gel de agarosa 37
2. Electroforesis en gel de poliacrilamida 38
3. Recuperación y purificación de fragmentos de ácido nucleico después de la separación por electroforesis en gel 39
Sección 3 Reacción en cadena de la polimerasa 40
1 Principios básicos y características de la tecnología PCR 40
2. Optimización del sistema y las condiciones de reacción de PCR 42
3. Desarrollo y aplicación de la tecnología de PCR 45 páginas
Sección 4 Tecnología de hibridación molecular de ácidos nucleicos 47
1. Principio de hibridación de ácidos nucleicos 47
En segundo lugar, preparación de la sonda de ácido nucleico 47
3. Tipos y métodos de hibridación de ácidos nucleicos 53
Resumen del capítulo 59
Preguntas para pensar 59
Capítulo 4 Digestión, ligadura y modificación enzimática de moléculas de ácidos nucleicos
Sección 1 Digestión enzimática de moléculas de ADN 61
I. Endonucleasa de restricción 61
2. Métodos de escisión del ADN por endonucleasa de restricción 64 p>
Tres. Factores que afectan la actividad de las enzimas de restricción 66
IV. Aplicación de la Digestión con DNasa 68
Sección 2: Conexión de Moléculas de ADN 68
I Ligasa 69
II. Ligación de fragmentos de ADN con extremos adhesivos 70
III. Ligación de fragmentos de ADN de extremos romos 70
IV. Factores que afectan la reacción de ligadura 72
Sección 3 Modificación de moléculas de ADN 73
1. Enzimas modificadoras del ADN 73
2. Modificación del ADN por la polinucleótido quinasa 74 T4
3. Modificación del ADN con fosfatasa alcalina 75
Descripción general de este capítulo 75
Preguntas para pensar 76
Capítulo 5 Vectores de ingeniería genética 77
Sección del capítulo 1 Vectores plásmidos 77
I. Características biológicas generales de los plásmidos 77
II. Condiciones necesarias para los vectores plásmidos ideales 78
III. Vectores plásmidos comúnmente utilizados 79
Parte 2 Vectores fagos 82
1. Características biológicas de los vectores fagos 82
II. Vector fago lambda 83
Sección 3 Otros portadores 88
I. Vector de levadura 89
II. Vector cromosómico artificial 91
Parte IV. Vector de Expresión 94
I. Vector de Expresión Procariota 94
II. Vector de expresión eucariota 95
Resumen de este capítulo 100
Preguntas para pensar 101
Capítulo 6 Clonación del gen diana 102
Primer párrafo El El gen diana 102 se obtuvo mediante el método de amplificación por PCR.
Primero, ¿RT? Método de PCR 102
II. Otros métodos de PCR 104
Sección 2 Síntesis de genes 109
I. Principios de la síntesis de ADN 109
2. . Gen sintético 110
Sección 3: Clonación de ADN genómico +012
1. Construcción y detección de biblioteca genómica 112
2. Biblioteca de fragmentos grandes en Aplicaciones. en Genómica Ambiental 115
Sección 4 Construcción y cribado de la biblioteca de ADNc 116
1 Extracción de ARN e identificación de la calidad 116
2 Construcción de la biblioteca de ADNc 119<. /p>
3. Evaluación de la calidad de la biblioteca de ADNc 120
Sección 5 Tecnología de clonación diferencial 121
1. Tecnología de visualización diferencial de ARNm (DDRT-PCR) 121
En segundo lugar, suprimir la hibridación sustractiva 123
Mutación del ADN de la sección 6 124
I. Mutación dirigida al sitio 125
Segunda mutación aleatoria 128
Sección 7 Transformación, cribado e identificación 129
1. Introducción de ADN recombinante en células receptoras 129
2 Cribado e identificación de recombinante 133
Tres. Secuenciación de ADN 136
Resumen de este capítulo 139
Preguntas para pensar 140
Capítulo 7 Ingeniería genética de células procarióticas 141
Sección 1 Expresión procariótica Sistema 141
I. Bacteria huésped 141
II. Vector de expresión procariótica 143
Tercero, preferencia de codón 148
Cuatro copias del plásmido número 149
Sección 2 Estrategia de expresión procariótica 149
1. Incluyendo expresión corporal 149
2. Expresión secretora de 150
Tres. Expresión de fusión 150
IV. Otras expresiones 151
Sección 3 Cultivo a gran escala de bacterias genéticamente modificadas 152
1. Características de fermentación de las bacterias genéticamente modificadas 152
2. modelo de cultivo 153
3. Reactores de fermentación relacionados 155
Sección 4 Aislamiento y purificación de productos de expresión procariotas 156
1 Objetivos y estrategias de aislamiento y purificación 156
2. Proceso general 158
3. Disolución y renaturalización de cuerpos de inclusión de proteína recombinante 160
IV. Concentración de proteína secretada 161
Sección 5: Inestabilidad y contramedidas de las bacterias genéticamente modificadas 162
1. Razones de la inestabilidad de las bacterias genéticamente modificadas 162
II. Mejorar la inestabilidad de las bacterias genéticamente modificadas 163
Sección 6 Ejemplos de expresión procariótica 165
Resumen de este capítulo 166
Preguntas para pensar 166
Capítulo 8 Ingeniería genética de levaduras 168
Sección 1 Sistema de expresión de ingeniería genética de levaduras 168
1. Sistema huésped de expresión de genes de levaduras 168
2. /p>
Tres. Método de conversión 173
Sección 2 Sistema de expresión de genes de levadura común 174
1. Sistema de expresión de Saccharomyces cerevisiae 174
2 Sistema de expresión de Pichia pastoris 176
Sección 3 Factores que afectan la expresión de genes extraños 179
1. Control del nivel de transcripción 179
2. Número de copias y estabilidad del vector de expresión 179
3. Otros factores 180
4. Nuevas direcciones de aplicación de los sistemas de expresión de levaduras 180
Sección 4. Ejemplos de aplicación de la ingeniería genética de levaduras 181
1. levadura para producir vacuna contra la hepatitis B 181.
2. La levadura recombinante produce albúmina sérica humana 182
Resumen de este capítulo 183
Preguntas para pensar 183
Capítulo 9 Ingeniería genética animal 184
Sección 1 Ingeniería genética de células animales 184
1. Sistema de expresión de células animales 184
2 Construcción y optimización del vector de expresión de células animales 188
p>3. Métodos de transformación y cribado de células animales 191
Sección 2 Animales transgénicos 194
1. El concepto de animales transgénicos 194
2. .Manipulación transgénica de mamíferos 194
3. Integración y expresión de genes extraños 199
Sección 3 Perspectivas de aplicación de la tecnología animal transgénica 202
1. Investigación sobre la función de los genes 202
2. Medicina 203
3. Aplicación en medicina 204
Resumen del capítulo 205
Preguntas para pensar 206
Capítulo 10 Ingeniería genética vegetal 207
Sección 1 Receptor transgénico en ingeniería genética vegetal 207
1 Características genéticas de plantas superiores 207
Segundo, sistemas receptores de tejido cali 208
III. Protoplasto 209
IV.
Sistema receptor de germoplasma 209
Verbo (abreviatura de verbo) Sistema receptor del cuerpo embrioide 210
6. Sistema receptor de yemas de diferenciación directa 210
Capítulo Sección 2 Ingeniería genética vegetal Vectores 210
1. Tipos y características de los vectores de ingeniería fitogenética 210
2. Construcción de los vectores de ingeniería fitogenética 211
Tercer sistema de expresión genética de las plantas superiores 215
1. Gen exógeno del sistema de inducción de tetraciclina 215
2. Gen exógeno del sistema de inducción de etanol 216
3. Sistema de inducción de esteroides de genes exógenos 217
Sección 4 Métodos transgénicos de plantas 218
1. Método mediado por Agrobacterium tumefaciens 218
2. Método de pistola genética 220
p>
3. Método de paso del tubo polínico 222
4. Otros métodos transgénicos 223
Sección 5 Cribado e identificación de plantas transgénicas 225
1. Cribado biológico 225
2. Detección de expresión de genes marcadores 225
3. Identificación molecular de genes diana y su expresión 227
Sección 6 Ejemplos de aplicación de ingeniería genética vegetal 228
1. Uso de tecnología de ingeniería genética para producir arroz dorado transgénico 228
Dos. Plantas transgénicas resistentes a insectos 228
3. Cultivo de plantas resistentes a herbicidas
Resumen del capítulo 229
Preguntas para pensar 230
Capítulo 11 Nuevas tecnologías relacionadas con la ingeniería genética 231
Sección 1 Bioinformática 231
1. Descripción general de la bioinformática 231
2. Base de datos de bioinformática 231
III. Recuperación y estrategia de información biológica 232
IV. Análisis de comparación de secuencias 232
Verbo (abreviatura de verbo) Análisis de secuencia de ácidos nucleicos 234
6 Análisis de la estructura de proteínas 236
Sección 2 Tecnología de chips 238
p>1. Principios de los chips genéticos 238
2. Tipos de chips genéticos 238
3. Pasos básicos de la tecnología de fabricación de chips genéticos 240
Cuatro. Aplicación de la tecnología de chips genéticos 241
Sección 3 Proteómica y dos híbridos de levadura 242
1. Proteómica 242
2. >
Resumen del capítulo 247
Preguntas para pensar 247
Capítulo 12 Aplicación de la tecnología del ADN recombinante 248
Sección 1 Diagnóstico de enfermedades y ADN 248
1. La importancia del diagnóstico genético 248
2. Los principios y características del diagnóstico genético 249
3. Métodos de diagnóstico genético 249
IV. Aplicación del diagnóstico genético 252
Problemas y perspectivas del verbo (abreviatura de verbo)
Sección 2 Terapia genética de enfermedades 254
p>
1. El concepto y contenido de la terapia génica 255
2. El mecanismo molecular de la terapia génica 255
3. Sistema de transporte 256
IV. Estrategias y métodos de terapia génica 256
Verbo (abreviatura de verbo) Ejemplos de terapia génica de enfermedades 257
Problemas y perspectivas de los verbos intransitivos
Sección 3 Prevención y Tratamiento de enfermedades infecciosas 259
1. Características de las enfermedades infecciosas nuevas y recurrentes 260
2 Nuevas estrategias y contenidos de investigación para la prevención y el tratamiento de enfermedades infecciosas 260 páginas
3. Vacunas genéticamente modificadas 261
4. Anticuerpos modificados genéticamente 264
Verbo (abreviatura de verbo) Perspectivas de aplicación y perspectivas de la tecnología de ADN recombinante en la prevención y el tratamiento de enfermedades infecciosas
Sección 4 Ingeniería de proteínas 265
1. Concepto y contenido de la investigación de la ingeniería de proteínas 265
2. Estrategias racionales para el diseño molecular de la ingeniería de proteínas 266
3. Métodos de transformación dirigida a proteínas 266
V. Perspectivas y perspectivas de la ingeniería de proteínas 268
Sección 5: Ingeniería de enfoque 268
1. 268
2. Principios básicos de la ingeniería de caminos 269
3. Proceso básico de la ingeniería de caminos 269
4.
Verbo (abreviatura de verbo) Perspectivas y perspectivas de la ingeniería de rutas 272
Resumen del capítulo 272
Preguntas para pensar 272
Capítulo 13 Gestión de productos de ingeniería genética, Patentes y seguridad
Sección 1 Requisitos de gestión de laboratorio 273
1. Concepto y base de la gestión de bioseguridad de laboratorio 273
2. Requisitos de hardware de gestión de bioseguridad de laboratorio 274 p>
3.
Procedimientos básicos de bioseguridad en laboratorios generales 275
Sección 2 Liberación, manejo y requisitos de productos de ingeniería genética 275
1. Liberación de productos de ingeniería genética 275
2. Gestión de productos de ingeniería genética 277
3. Requisitos de gestión y medidas específicas para productos de ingeniería genética 278
Sección 3 Gestión de patentes 280
1. protección de patentes para productos de ingeniería 280
2. Disputas sobre protección de patentes de productos de ingeniería genética 281
3.
Condiciones para la protección mediante patente de productos genéticos: tres requisitos 283
Resumen del capítulo 284
Preguntas para reflexionar 284
Índice 285
Referencias 288