Experimento de microbiología
Tinción
(1) Tinción inicial
Añadir una gota de violeta cristal de oxalato de amonio durante 1 minuto aproximadamente y lavar con agua.
(2) Mordiente
Agregue solución de yodo gota a gota para eliminar el agua restante, tiñe durante aproximadamente 65438 ± 0 minutos y lave con agua.
(3) Decoloración
Enjuague el agua del portaobjetos de fondo blanco e instile con alcohol al 95% hasta que el alcohol que fluye simplemente no se vea morado, aproximadamente de 20 a 30 segundos. enjuague el alcohol inmediatamente con agua.
(4) Doble teñido
Teñir con solución de azafrán durante 1-2 minutos y luego lavar con agua.
(5) Examen microscópico
Después del secado, observar con una lente de aceite. Las bacterias Gram negativas son rojas y las bacterias Gram positivas son moradas. Una reacción de tinción de Gram basada en bacterias dispersas, donde las bacterias que están demasiado densamente empaquetadas tienden a ser falsos positivos.
(6) De la misma manera, se mezclaron E. coli y B. subtilis en un portaobjetos de vidrio para comparar con la tinción de Gram.
Nota: Se debe controlar estrictamente el tiempo de teñido. La clave es controlar estrictamente el grado de decoloración del alcohol. Una decoloración excesiva puede manchar por error las bacterias positivas y convertirlas en bacterias negativas. Cuando la decoloración es insuficiente, las bacterias negativas pueden teñirse erróneamente como bacterias positivas. Además, la edad de las bacterias también influye en los resultados de la tinción. Por ejemplo, si las bacterias positivas se han cultivado durante demasiado tiempo o han muerto, algunas bacterias se disolverán por sí solas y, a menudo, serán negativas.