¿Cuál es la diferencia entre un espectrómetro de fluorescencia y un espectrofotómetro UV-visible?
Principio de detección:
El espectrofotómetro ultravioleta-visible utiliza una lámpara de tungsteno de yodo (UV) y una lámpara de deuterio (luz visible) como fuentes de luz para excitar la muestra y recoger la intensidad de la luz transmitida a través del muestra después de comparar con la intensidad de la luz transmitida a través de la muestra de referencia, se registra el espectro de absorción obtenido registrando el cambio de la intensidad de la luz absorbida por la muestra en función de la longitud de onda de excitación.
El espectro de fluorescencia es un espectro de emisión obtenido utilizando una lámpara de yodo tungsteno (UV) y una lámpara de luz visible como fuente de luz para excitar la muestra, y recogiendo la intensidad de fluorescencia emitida por la muestra excitada como una función de la longitud de onda de excitación.
Objeto de detección:
El espectrofotómetro ultravioleta-visible detecta el proceso en el que la muestra se excita desde el estado fundamental electrónico al estado excitado electrónico.
La espectroscopia de fluorescencia detecta el proceso de transición de la muestra desde el estado electrónico excitado al estado fundamental.
Estructura del instrumento:
El espectrofotómetro UV-visible adopta una estructura de doble haz. La fuente de luz de excitación se divide en dos haces mediante un espectroscopio. Un haz pasa a través de la muestra. medido y el otro haz pasa a través de la muestra de referencia. Los dos haces de luz se separan mediante un monocromador y luego ingresan a un detector para medir la intensidad de la luz. Finalmente, se transfiere a la computadora para su procesamiento.
El espectro de fluorescencia adopta una estructura de trayectoria óptica única en ángulo recto. La fuente de luz de excitación primero se divide mediante un monocromador para obtener luz de una longitud de onda específica y luego es excitada por la muestra, con la dirección de excitación perpendicular a la muestra. Otro monocromador divide la fluorescencia emitida por la muestra y luego ingresa al detector para medir la intensidad de la luz. Finalmente, se transfiere a la computadora para su procesamiento.