Proceso de extracción de lumbroquinasa

Un método de producción de lumbroquinasa, caracterizado porque incluye los siguientes pasos: (1) Poner lumbroquinasa fresca en una canasta o limpiarla en el suelo, quitar la capa de tierra en la parte superior de las lombrices, esparcir las lombrices en una capa delgada. , e iluminar durante 10 a 18 horas, dejar que las lombrices expulsen la suciedad, enjuagar dos veces con agua del grifo para lavar la tierra y los objetos flotantes pegajosos, ponerlos en un balde de plástico, refrigerar para su uso posterior (2) Triturar las lombrices con coloides; en una suspensión y use una solución con un pH de 5,0 a 5,3. Se agrega citrato de sodio a etanol de baja concentración y se homogeneiza en una proporción de (v/v) 1:3-5. (3) Eliminación del residuo: use una sedimentación; centrifugar para eliminar el residuo grueso en el líquido de alimentación para obtener un sobrenadante (4) Agregar sulfato de amonio al sobrenadante salado a una concentración de saturación del 30%, agitar hasta que se disuelva completamente y dejar reposar durante 65,438 ± 0 horas; 5) Utilice una centrífuga vertical de alta velocidad para eliminar el residuo fino en el líquido material y realice una centrifugación de alta velocidad para obtener el líquido transparente (6) Ultrafiltrar el sobrenadante con una membrana de 50.000.000 Dalton para obtener ultrafiltrado; Separación por cromatografía en columna: bombee el ultrafiltrado al barril de descarga. Después de mezclar, tome una muestra. Una vez completado el muestreo, lave el ultrafiltrado con líquido de lavado hasta que el efluente sea de color amarillo claro, con un pH de 7,0 a 8,0 y luego ligeramente alcalino. use eluyente para eluir, de modo que el eluido se vuelva turbio y el color sea amarillo. Se vuelve rojo cuando la conductividad del efluente es ligeramente mayor que la del eluyente, comience a recolectar y eluya hasta que la alimentación sea clara, el color sea naranja claro; , y la conductividad alcanza la conductividad del eluyente. (8) Ultrafiltración: vierta el líquido recolectado en el tanque de almacenamiento, encienda la bomba, ajuste la velocidad a 265, 438+0×65, 438+02 rpm, ajuste la presión a no más de 0,65, 438+0 MPa y concéntrese a 65, 438+0/65, 438+05, luego clarifique el líquido recolectado y luego agregue agua desionizada a la columna para desalinización hasta que el líquido concentrado sea neutro (pH = 7. (9) Esterilización por filtración: use esterilización clarificada Filtre el líquido a través de la placa de filtro de malla tres veces hasta que el filtrado esté claro y use una membrana de filtro microporosa de 0,22 um para esterilizar y filtrar, grado 300.000 (10). Secar por aspersión en la torre de secado, controlar la temperatura de salida a 80-86; °C y seca el líquido. Recoge el polvo de enzima.

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