¿Se puede sustituir el diluyente de impedancia por agua destilada? ¿Por qué?
(1) El diluyente suele ser suero fisiológico, también se puede utilizar agua destilada o agua hervida fría. Para vacunas que requieran una dilución especial, utilice el diluyente especificado. Si la vacuna viene con diluyente, utilice el diluyente. No diluya la vacuna directamente con agua del grifo, agua de pozo o agua de río. El diluyente debe estar frío y se debe tener especial cuidado cuando hace calor. La dosis de diluyente debe calcularse y pesarse con cuidado y precisión.
(2) La dosis diluida debe ajustarse estrictamente a la dosis especificada en las instrucciones de uso de la vacuna y no debe aumentarse ni disminuirse a voluntad, de lo contrario puede provocar una insuficiencia inmune. Por ejemplo, la vacuna atenuada de embrión de pollo contra la peste de los patos se diluye 200 veces con 200 ml de solución salina fisiológica según la dosis prescrita y se inyecta 1 ml por vía intramuscular en cada pato.
(3) Los equipos de dilución, como jeringas, agujas y pinzas, deben desinfectarse estrictamente antes de su uso.
(4) El proceso de dilución debe estar protegido de la luz, a prueba de polvo y estéril. En particular, las vacunas inyectables deben ser estrictamente estériles. El proceso de dilución generalmente se lleva a cabo en etapas y los frascos de vacuna generalmente se enjuagan con diluyente de 2 a 3 veces.
(5) Se debe fijar una aguja esterilizada en el frasco de la vacuna diluida y cubrirla con un algodón con alcohol.
(6) La vacuna diluida debe consumirse lo antes posible y la vacuna no utilizada también debe almacenarse en un refrigerador o cubitera con hielo.
¿Quién conoce los ingredientes del diluyente de suero del kit ELISA?
Generalmente, se puede utilizar PBS o TBS como diluyente para muestras ELISA, y el valor de pH es de alrededor de 7,2-7,4. Se le agregarán algunos componentes proteicos (como 3BSA, 5-15FBS o suero homólogo al anticuerpo secundario), por un lado, para estabilizar la proteína objetivo en la muestra y, por otro lado, para reducir las proteínas no específicas. adsorción. Algunos diluyentes también agregan detergentes no iónicos (como Tween-100) para eliminar la adsorción no específica y mejorar la especificidad de la detección.
Por lo tanto, si la especificidad del reactivo de detección es alta y la sustancia que se detecta es pura, simplemente se puede diluir con PBS.
A menudo se añaden indicadores de cambio de color a los diluyentes de suero en kits disponibles comercialmente, que pueden cambiar de color combinándolos con proteínas u otros componentes del suero, o cambiando el valor del pH después de añadir el suero. Esto sirve para distinguir mejor qué pocillos están llenos de muestras y cuáles no, lo que facilita la operación de los inspectores y, por lo general, no tiene ningún impacto en las reacciones de antígenos y anticuerpos. Sin embargo, los ingredientes de estos indicadores de cambio de color están protegidos por patentes y no se divulgan, por lo que debe solicitar estos ingredientes al fabricante del reactivo.