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¿Cómo determinar la composición de la orina?

Todos los informes de las pruebas de morfología de la orina fueron escritos por el profesor Gu Keliang.

Extraí uno de ellos.

El examen del sedimento urinario también se llama examen del sedimento urinario. Es un método de examen que centrifuga la orina fresca y luego utiliza un microscopio para examinar el sedimento urinario [1]. Debido al desarrollo del análisis instrumental, los componentes visibles de la orina moderna pueden detectarse mediante no centrifugación, tinción por fluorescencia láser, análisis de flujo (Sysmex UF50, UF100) o un sistema de reconocimiento automático de imágenes por computadora (Iris IQ200), por lo que también puede llamarse análisis de partículas en orina[2]. En la actualidad, la mayoría de los laboratorios hospitalarios de mi país todavía están acostumbrados a los métodos tradicionales de microscopía ordinaria. Dado que hay muchos componentes visibles en la orina, como células, tubos, microorganismos, cristales, etc., para poder identificar e identificar aún más estos componentes, existen microscopios de contraste de fases, microscopios de polarización, microscopios de fluorescencia, microscopios de interferencia, microscopios electrónicos, etc., que se pueden dividir en métodos de tinción y métodos sin tinción. La prueba sin tinción es el método de prueba más simple y más utilizado. La importancia del examen de los componentes formados en la orina es que es un método de examen indispensable en el análisis de orina y tiene una importancia clínica importante para el diagnóstico clínico, el seguimiento del tratamiento y la investigación de la salud. Se puede determinar el tipo de células que ingresan al tracto urinario, como la policitemia, que indica sangrado del tracto urinario. Un examen más detallado de la morfología de los glóbulos rojos puede ayudar a determinar si el sangrado proviene del glomérulo o del tracto urinario inferior. Un aumento de los glóbulos blancos (pus) indica infección del tracto urinario; la proliferación de diferentes células uroteliales ayuda a determinar la ubicación de diversas lesiones del tracto urinario. Un aumento de los cilindros a menudo indica glomerulonefritis, túbulos renales (lesiones distales y de los conductos colectores) e insuficiencia renal; Descubrir cristales metabólicos o fuentes de fármacos también tiene un gran valor clínico [3].

1. Métodos de prueba para los componentes formados en la orina.

Existen muchos métodos para comprobar la formación de la orina. La siguiente es una breve explicación de los puntos clave de los 8 métodos de selección comparativos:

1. Método de centrifugación tradicional: Los Procedimientos Operativos de Inspección Clínica Nacional de 1997 [4] (Segunda Edición) estipulan claramente la orina no teñida. sedimento y orina teñida Procedimientos operativos para microscopía de sedimento, pero el tipo de centrífuga no se especifica en la operación. Solo estipula la centrifugación a 1500 r/min durante 5 minutos. No especifica el tiempo de retención de orina, el tiempo de inspección, la determinación de resultados y los métodos de informe. . La observación microscópica de tipo de almacenamiento 10×10, 10×40 y 10 campos muestra los valores más bajos y más altos de células. Los cilindros observados se identifican con un microscopio de alta potencia, pero el número de recuento se observa con un microscopio de baja potencia. microscopio. Observe 20 campos y calcule el resultado de registro promedio de un campo. Los autores examinaron los registros de análisis de orina de hospitales terciarios, secundarios y primarios. Algunos hospitales vierten el sedimento de orina en el recipiente para orina o en el tubo de ensayo directamente sobre el portaobjetos de vidrio (sin tapa) y no utilizan el recuento cuantitativo en placa de vidrio para informar. El informe todavía utiliza el signo más tradicional (-, +, ++, ++ , ++++), los cilindros y las células epiteliales no se clasifican, informan un poco , +, ++. La orina en la sala a menudo se puede retener unas horas antes del examen (las normas estipulan claramente 6550 con el estómago vacío por la mañana). Debe enviarse para inspección dentro de 1 hora) Este método tradicional es aleatorio y cambiante, afectado por la subjetividad del operador, el juicio no está estandarizado, los resultados son inconsistentes y no hay comparabilidad. Debido a que el método de presentación de informes varía de persona a persona, es un método experimental que carece de estándares y debe eliminarse.

2. Método de microscopía estándar: en respuesta a la situación anterior, el Grupo de Laboratorio Clínico de la Rama de Laboratorio de la Asociación Médica China celebró tres reuniones de estandarización de microscopía de orina en 2002 y presentó sugerencias para la estandarización de la orina. pruebas de sedimentos [5] . Se recomienda que se especifiquen claramente los materiales e instrumentos, las muestras, la recolección y el transporte, los procedimientos operativos y el contenido del informe de sedimento de orina para el examen del sedimento de orina. Por ejemplo, la fuerza centrífuga relativa de los recipientes, los tubos de centrífuga, las placas de recuento de sedimentos de orina y las centrífugas (horizontales) debe ser de alrededor de 400 × g, mientras que los microscopios requieren fuentes de luz integradas con intensidad de luz ajustable, lentes de objetivo de 40x, 10x y Lentes de objetivo 10x. Existen regulaciones claras para la recolección, transporte y recepción de muestras. Este método es adecuado para la promoción en unidades médicas de todos los niveles y se puede completar acelerando la lectura -10 o el tablero Kova. Debido a la operación unificada, los resultados precisos y los informes consistentes, es un método recomendado para el examen de sedimentos de orina. El problema es cómo establecer un sistema de garantía de calidad, realizar controles de calidad en interiores, contactar estrechamente con la evaluación de calidad clínica e interventricular y realizar capacitación profesional regular sobre sedimentos para que la identificación de sedimentos de orina sea competente y no pasar por alto los requisitos de los componentes patológicos tangibles [5].

3. Método de tinción de componentes formados en orina: las funciones de la tinción de componentes formados en orina son: (1) prevenir la fuga de trombos; (2) prevenir diagnósticos erróneos (3) prevenir la fatiga del examen microscópico; (4) Crear condiciones para la preservación a largo plazo de los componentes patológicos típicos en la orina y proporcionar mapas para la enseñanza y la investigación científica. Los métodos cromosómicos para los componentes formados en la orina se pueden dividir en: ① tinción única; ② tinción compuesta; ③ tinción diferencial; ⑤ tinción especial, etc. Ito de Japón recomendó un método estándar de recolección de orina y cuatro métodos de tinción. El protocolo de examen de orina Gp16A [7] publicado por NCCLS mencionó que "los métodos de tinción son muy útiles en la identificación de células y cilindros" y recomendó la tinción con Malbin (métodos violeta cristal y amarillo arena) y azul de toluidina al 0,5%. Al mismo tiempo, se enumeran métodos de tinción especiales para identificar una diezmilésima parte de la orina: ① Grasa y grasa corporal ovalada: rojo aceite o rojo Sudán ② Bacterias: tinción de Gram y tinción de Papanicolaou [7]. El Grupo Europeo de Análisis de Orina citó el método de tinción de Sternheimer, y el azul alcián-pironina B)[2] b[2] fue superior al método de tinción de Sternheimer-Malbin.

Nuestro laboratorio de orina también ha confirmado que la tinción S puede compensar las deficiencias de la tinción S-M y es el mejor de los seis métodos de tinción [8].

4. Método de filtración de partículas en la orina: una cierta cantidad de orina (20 ~ 100 ml) se puede filtrar a través de un filtro especial y las partículas patológicas como cilindros y células se pueden retener en el filtro [10]. , algunos glóbulos rojos se pueden observar bajo un microscopio electrónico a través del filtro [11]. También hemos visto productos comerciales con jeringas y filtros especializados en el Laboratorio de Urología del Hospital Universitario de Bonn, Alemania. Desafortunadamente, debido a que el filtro debe teñirse e identificarse, algunas células se lisarán después de la tinción y este método es costoso, por lo que es difícil de popularizar [12].

5. Método de detección rápida para contar la orina sin centrifugación en la celda de recuento de células: colocar directamente la orina sin centrifugación en la celda de recuento de células de la orina es un método cuantitativo introducido en los Procedimientos Operativos de Inspección Clínica Nacional. , no recomendado en Europa. Debido a que los resultados son insensibles y no están estandarizados, los resultados son inestables [2]. Sin embargo, el autor observó una vez 5 células × 2 en el grupo mejorado de recuento de células sanguíneas de Neubauer en el Sexto Hospital Popular de Shanghai, y los resultados experimentales se obtuvieron rápidamente. Los urólogos creen que es útil observar la afección y juzgar la eficacia y dirección de la afección. Sin embargo, en el extranjero se destaca que para la inspección completa de líquidos se utiliza la placa de Fuchs-Rosenthal con una concentración de 0,2 mm (área total de 0,0625 mm2), que tiene un amplio campo de visión y resultados más precisos y confiables [2 ].

6. Estación de trabajo de sedimento de orina: la estación de trabajo integra un microscopio con cámara, una placa de conteo de sedimento de orina y una computadora, como Plyson AMP-2000U, Huaxin DiasysR/S, Hefei Crescent SQ-3000, Medatech, Chongqing. Tianhai US2020, analizador de sedimento de orina teñido QO-S en línea de Beijing Guolian, analizador de sedimento de orina de proceso Qiansheng QS8005. Incluyendo una sala de conteo móvil estándar, varios controles de teclado, reconocimiento de códigos de barras estándar, limpieza automática, muestreo automático y un mapa de campo visual que se puede copiar durante los informes). Independientemente del fabricante que produzca la estación de trabajo de sedimentos de orina, debe hacer hincapié en la estandarización, es decir, el volumen de la muestra de orina, la fuerza centrífuga, el tiempo de centrifugación, la retención de sedimentos, la lente del microscopio (preferiblemente con una lente de contraste de fase), el método de informe, etc., deben cumplir. con los requisitos de un microscopio estándar. La ventaja de este método son los informes informáticos. La limpieza de los tableros de las computadoras móviles requiere la eliminación de la suciedad de las proteínas, un conteo e identificación automáticos completos y evitar factores subjetivos.

7. Citómetro de flujo de tinte fluorescente: los citómetros de flujo de sedimento urinario UF50 y UF-100 producidos por Sysmex Company utilizan los componentes visibles del ADN y la membrana celular en el sedimento y dos tintes fluorescentes, fenantridina y cianuro de carbonilo. y luego la irradiación con láser a través del flujo de la vaina, cada componente del bigote genera una intensidad de luz dispersada hacia adelante y un ancho de pulso de fluorescencia, y luego los diagramas de dispersión y los histogramas del tamaño de los glóbulos rojos y de las células sanguíneas se miden mediante impedancia eléctrica. El instrumento puede informar automáticamente cinco parámetros cuantitativos de glóbulos rojos, glóbulos blancos, células epiteliales, cilindros y bacterias, y cinco parámetros cualitativos de células epiteliales pequeñas y redondas, moho, cilindros patológicos, cristales y espermatozoides. También puede medir la orina. conductividad. Dado que no hay necesidad de centrifugación, la velocidad de detección es rápida y la sensibilidad y repetibilidad de los componentes patológicos son buenas. Dado que el patrón de pasos de detección de cada muestra de orina es consistente, es conveniente para el control de calidad (usar estándares para detectar partículas). y estandarización. Si se combina con papel de prueba de químico seco, el grado de concordancia entre los dos también se puede observar mediante procesamiento informático, lo que ha llamado la atención en el diagnóstico clínico de hematuria, la determinación de infección del tracto urinario y la comprensión de la función renal. Las desventajas del instrumento son que es costoso y no puede detectar tricomonas, gotitas de grasa, patologías y cristales de fármacos, ni puede identificar cuerpos de inclusión virales o células tumorales cuando hay una gran cantidad de bacterias, levaduras, cristales y otras partículas; en la orina, puede interferir con los resultados del recuento de glóbulos rojos; los glóbulos rojos oscuros y varios cilindros patológicos no se pueden identificar en la imagen [13].

8. Sistema de diagnóstico por imágenes de orina in vitro: microscopio inteligente totalmente automático (AIM): la estación de trabajo del microscopio de iris amarillo de 1983 fue presentada por IRIS Company. Se obtienen imágenes de varias partículas de la orina en el AIM y se procesan en la computadora. Después del procesamiento, se muestra en la pantalla fluorescente. En 2000, la compañía presentó el analizador de orina completamente automático 939UDX mejorado a gran escala y en 2002 aprobó el pequeño sistema IQ-200 certificado por la Administración de Alimentos y Medicamentos de EE. UU. (FDA). Incluyendo un microscopio patentado sin portaobjetos y un software exclusivo de codificación de alta velocidad, podemos ver fácilmente una variedad de lágrimas comunes en la orina, a saber, glóbulos blancos, glóbulos blancos, glóbulos rojos, células escamosas, células no escamosas y cilindros hialinos. , Cilindros, cristales, bacterias, levaduras, espermatozoides y mocos no clasificados. Los resultados de la identificación se pueden modificar según las necesidades del operador para distinguir subtipos de componentes visibles en la orina. El IQ-200 es, en principio, avanzado. Integra el tamaño, el contraste, la forma, la textura y otros parámetros técnicos de varias partículas en la orina y utiliza una computadora altamente sensible para determinar la naturaleza de las partículas. Según informes preliminares, la sensibilidad general del IQ-200 es del 83% (incluido el 89,4% para los glóbulos rojos, el 93,9% para los glóbulos blancos y el 93,9% para las bacterias). La especificidad general fue del 83,3% (incluido el 89,2% para los glóbulos rojos, el 88,8% para los glóbulos blancos y el 88,1% para las bacterias). La tasa de reexamen con el microscopio IQ-200 puede ser inferior al 5% (la UF suele estar por encima del 20%), pero ¿es necesario utilizar este método para identificar mejor varios cilindros celulares, como la tinción de Hansen para eosinófilos o la tinción de Sudán? rojo ⅲLos cilindros de grasa teñidos, etc., no se han resuelto. El instrumento es pequeño y portátil y muestra en la pantalla una variedad de partículas patológicas y partículas de control de calidad relacionadas. Sin embargo, no se encontró ningún sistema de flujo de vaina de presión en este instrumento y faltaban datos de tinción intuitivos.

En la exposición, el fabricante propuso comparar 456 muestras de orina con UF-100. IQ-200 encontró 14 tubulares patológicos. UF-100 detectó 65438+.

2. Identificación de los componentes formados de la orina

Hay más de 45 componentes en la orina, que son relativamente comunes.

1. Glóbulos rojos: Los glóbulos rojos típicos de la orina tienen forma de disco bicóncavo, de color amarillo claro, de aproximadamente 8 µm de diámetro y son fáciles de identificar. Sin embargo, debido a la complejidad y diversidad de las partículas de orina, los glóbulos rojos urinarios pueden sufrir cambios de forma debido a la alta temperatura, el tiempo prolongado, los cambios de pH y los cambios de presión osmótica. Los examinadores inexpertos deben distinguirlo de hongos similares a levaduras, esporas de hongos, gotitas de grasa, gránulos de almidón, cristales de oxalato de calcio, cristales de urato y cabezas de esperma. Pasa la prueba.

2. Glóbulos blancos: Las células de la orina son principalmente neutrófilos, con ocasionales monocitos, linfocitos y eosinófilos. La aparición de glóbulos blancos en la orina fresca es completa, con un diámetro circular de 65,438+00um ~ 65,438+04um, los gránulos en el citoplasma son visibles y los núcleos son claros y a menudo dispersos. En la orina hipotónica y alcalina, los glóbulos blancos a menudo se hinchan y aproximadamente la mitad se pueden disolver en 2 horas, mientras que en la orina hipertónica y ácida. El plasma de leucocitos en la orina vieja es gelatinoso debido a la homogeneización. Durante la inflamación, la mayoría de los glóbulos blancos desnaturalizados tienen una apariencia irregular y una estructura borrosa. El citoplasma puede estar lleno de partículas gruesas y la estructura nuclear no está clara. Las células a menudo se pegan entre sí y tienen límites celulares poco claros, que se denominan células de pus. Los glóbulos blancos se pueden dividir en: (1) células muy teñidas: glóbulos blancos muertos o envejecidos teñidos de forma oscura; (2) células ligeramente teñidas: las células ligeramente teñidas son leucocitos activos, visibles cuando la gravedad específica de la orina es > 1015 (3; ) células flash: en niveles bajos de derrame, los neutrófilos aumentan de tamaño y las moléculas se mueven a través del citoplasma. Los destellos se pueden ver cuando la luz se refracta. 3. Cilindros: Son un componente importante de los componentes visibles de la orina. Su cantidad y tipo son de cierto valor para el diagnóstico, observación del tratamiento y juicio final de las lesiones del parénquima renal. Tres cilindros celulares comunes son los cilindros de glóbulos rojos, los cilindros de células epiteliales tubulares renales y los cilindros de células epiteliales tubulares renales.