¿Por qué es necesario utilizar el tinte verde Janus para observar las mitocondrias?

Principio: La citocromo oxidasa en las mitocondrias mantiene el tinte en su estado oxidado (es decir, estado coloreado) azul verdoso, mientras que el tinte se reduce a incoloro en el citoplasma circundante, lo que facilita su observación.

Las mitocondrias son orgánulos que se encuentran en la mayoría de las células y están recubiertas por dos membranas. Es la estructura que genera energía dentro de las células y es el lugar principal donde las células realizan la respiración aeróbica. Se llama "Casa de Energía". Su diámetro es de aproximadamente 0,5 a 65438 ± 0,0 micras.

Con la excepción de Entamoeba histolytica, Giardia lamblia y varias especies de microsporidios, la mayoría de las células eucariotas tienen cierto grado de mitocondrias, pero su propio tamaño, número y apariencia mitocondrial son diferentes.

Datos ampliados

Notas sobre los experimentos de observación:

1. Para garantizar la integridad de las mitocondrias durante toda la operación, el entorno operativo, como la temperatura ( 0-4 ℃), el valor del pH (alrededor de 7,0) debe mantenerse lo más constante posible y el tiempo de funcionamiento debe ser lo más corto posible.

2. Las células del cultivo de tejidos deben digerirse cuidadosamente para evitar su pérdida o duplicación.

3. Al homogeneizar, el medio utilizado debe ser un tampón isotónico, habitualmente se utiliza solución de sacarosa de 0,25 mol/L o solución salina fisiológica, no solución de Hank.

4. La cantidad de homogeneizado depende de la estanqueidad del homogeneizador. Muy pocas veces y el daño celular incompleto afectará el rendimiento mitocondrial.

5. Por tanto, utilizar 2/3 del sobrenadante para preparar las mitocondrias y evitar que el exceso de restos celulares afecte a la observación.

6. Generalmente, todo el proceso de separación debe completarse en 30-60 minutos, no demasiado.

Enciclopedia Baidu - Janus Green