¿Cuáles son los métodos para medir proteínas y aminoácidos? Pídele ayuda a DiosHola cartel: El método más básico para medir las proteínas es el método de determinación de nitrógeno, que significa medir primero el nitrógeno total en la muestra y luego calcular el contenido de proteínas en la muestra según la nitrógeno total. El método más utilizado para determinar el contenido de proteínas es el método Kjeldahl. El método Kjeldahl es uno de los métodos más precisos y sencillos para determinar el nitrógeno orgánico total y se utiliza ampliamente en el país y en el extranjero. Además, el método de pulso de doble contracción, el método de unión de colorante y el método de reactivo de fenol también son métodos comúnmente utilizados para determinar el contenido de proteínas. Debido a que este método es simple y rápido, a menudo se utiliza para análisis de control de calidad en unidades de producción. Determinación de proteínas y aminoácidos La proteína es la base material de la vida y un componente importante del tejido celular biológico. Todos los seres vivos contienen diferentes tipos de proteínas. El mantenimiento del equilibrio ácido-base y el equilibrio hídrico del cuerpo; la transmisión de información genética y el metabolismo y transporte de sustancias están relacionados con las proteínas. Los humanos y los animales sólo pueden obtener proteínas y sus productos de descomposición de los alimentos para formar su propia proteína, por lo que la proteína es un nutriente importante para el cuerpo humano y un indicador nutricional importante en los alimentos. La proteína es un compuesto orgánico complejo que contiene nitrógeno y tiene un gran peso molecular. Está compuesto por 20 aminoácidos unidos mediante enlaces amida de cierta manera y tiene una determinada estructura espacial. Diferentes proteínas tienen diferentes proporciones y patrones de composición de aminoácidos, por lo que diferentes proteínas tienen diferentes contenidos de nitrógeno. Las proteínas pueden hidrolizarse mediante enzimas, ácidos o bases y los productos finales son aminoácidos. Los aminoácidos son las sustancias más básicas que forman las proteínas. Entre los aminoácidos que forman las proteínas, ocho aminoácidos, entre ellos leucina, isoleucina, lisina, fenilalanina, metionina, treonina, triptófano y valina, no pueden sintetizarse en el cuerpo humano, por lo que se denominan aminoácidos esenciales. Tienen funciones fisiológicas extremadamente importantes para el cuerpo humano, a menudo causan enfermedades por falta en el cuerpo o las complementan para mejorar el metabolismo. Por tanto, la separación, identificación y cuantificación de proteínas y aminoácidos en los alimentos y sus materias primas son de gran importancia. Determinación de proteínas La determinación de proteínas es el método más básico para medir el nitrógeno, es decir, primero medir el nitrógeno total en la muestra y luego calcular el contenido de proteínas en la muestra a partir del nitrógeno total. El método más utilizado para determinar el contenido de proteínas es el método Kjeldahl. El método Kjeldahl es uno de los métodos más precisos y sencillos para determinar el nitrógeno orgánico total y se utiliza ampliamente en el país y en el extranjero. Además, el método de pulso de doble contracción, el método de unión de colorante y el método de reactivo de fenol también son métodos comúnmente utilizados para determinar el contenido de proteínas. Debido a que este método es simple y rápido, a menudo se utiliza para análisis de control de calidad en unidades de producción. Este método es adecuado para la determinación de proteínas en diversos alimentos. 1. Principio: Los alimentos se calientan y digieren con ácido sulfúrico y un catalizador para descomponer las proteínas. El amoníaco descompuesto se combina con el ácido sulfúrico para formar sulfato de amonio. Luego el amoníaco se libera mediante destilación alcalina. Después de ser absorbido por el exceso de ácido bórico, se titula con una solución estándar de ácido sulfúrico o ácido clorhídrico. El contenido de proteínas se obtiene multiplicando el consumo de ácido por el factor de conversión. El proceso de reacción se divide en tres etapas, representadas por la siguiente ecuación de reacción. ① Digestión 2nh 2(CH2)2coo H4-13 h2so 4-(NH.)2s 04 6 C02 12s 0 = 16h 20(NH4)2s 04 2na()h-2 NH3 diez 2h 20. Na2s042nh3 4h3803-, (NH4)2 B207 5H20 ③ Titulación (NH4)2 B207 2 HCl 5h 20-nh4c 1 4h 38032. Instrumentos ① Digestor. (2) Dispositivo de destilación de nitrógeno Kjeldahl. 3. Todos los reactivos utilizados se preparan con agua destilada y no contienen amoniaco. Los reactivos son de calidad analítica. ①CuS04 .②K2SO .③H2SO 4 concentrado. ④2 Solución de onda de hidrógeno. ⑤Indicador de mezcla: cuando lo use, mezcle 1 parte de una solución de etanol de rojo de metilo al 0,1 y 5 partes de una solución de etanol de verde de bromocresol al 0,1. También puede mezclar 2 partes de una solución de etanol al 0,1 de rojo de metilo y 1 parte de una solución de etanol al 0,1 de azul de metileno. ⑥ Hidróxido de sodio saturado: agregar 500 g de hidróxido de sodio a 500 ml de agua, remover para disolver, enfriar y dejar reposar unos días y utilizar después de la clarificación. ⑦ 0,01 herramienta. La herramienta 1' o 0,05 se denomina solución estándar de HCl (debe calibrarse con carbonato de sodio anhidro antes de su uso).
4. Pasos de la operación ① Digestión de la muestra: Pese con precisión de 0,2 a 2,0 gramos de muestra sólida o de 2 a 5 gramos de muestra semisólida o pipetee de 5 a 20 ml de muestra líquida. Liberar 500 millas náuticas. Agregue 0,2 g de sulfato de cobre, 3 g de sulfato de potasio y 20 ml de HzSOa concentrado a un matraz Kjeldahl seco, coloque un embudo pequeño en la boca del matraz Kjeldahl, use 45. El ángulo está apuntalado en diagonal sobre una malla de amianto con pequeños agujeros. (Para una consulta más detallada, consulte www.rmhot.com, Red Nacional de Materiales Estándar) Utilice una estufa eléctrica para calentar a fuego lento. Después de que el contenido esté completamente carbonizado y deje de formar espuma, aumente la potencia del fuego para mantener el líquido en la botella ligeramente hirviendo y continúe calentando ligeramente durante 30 minutos hasta que el líquido se vuelva azul verdoso y transparente. Enfriar, agregar con cuidado 20 mL de agua, luego enfriar a temperatura ambiente, transferir a un matraz aforado de 100 mL, lavar el líquido de lavado del matraz con una pequeña cantidad de agua y ponerlo en el matraz aforado, agregar agua hasta la marca, mezclar bien y dejar a un lado. Excepto que no se agrega ninguna muestra, tome la misma cantidad de sulfato de cobre, sulfato de potasio y ácido sulfúrico que la muestra procesada y use el mismo método para la digestión del blanco de reactivo. (2) Agregue el agua en la botella del generador de vapor hasta aproximadamente 2/3, agregue unas gotas de solución indicadora de rojo de metilo y unos mililitros de ácido sulfúrico para mantener el agua ácida, agregue unas perlas de vidrio para evitar que hierva y ponga el agua en la botella del generador de vapor El agua se calienta y se hierve. (3) Agregue 10 ml de solución de ácido bórico y L gotas de solución indicadora mixta en la botella receptora, inserte el extremo inferior del tubo del condensador debajo de la superficie del líquido y extraiga 10 ml. El diluyente de digestión de la muestra fluye desde el vaso pequeño hacia la cámara de reacción, enjuaga el vaso pequeño con 10 ml de agua, fluye hacia la cámara de reacción y tapa el tapón de vidrio en forma de varilla del vaso pequeño. Vierta de 3 a 10 ml de solución saturada de hidróxido de sodio en un vaso pequeño, levante el tapón de vidrio para que fluya lentamente hacia la cámara de reacción, cubra inmediatamente el tapón de vidrio herméticamente y agregue agua al vaso pequeño para evitar fugas de aire. Apriete la abrazadera del tornillo y comience la destilación. Se introduce vapor en la cámara de reacción, lo que permite que el amoníaco ingrese al matraz receptor a través del tubo del condensador y se lleva a cabo la destilación durante 2 a 5 minutos. Luego mueva el matraz receptor de modo que el extremo inferior del tubo del condensador esté alejado de la superficie del líquido, luego enjuague el exterior del extremo inferior del tubo de condensación frío con una pequeña cantidad de agua neutra, luego destile el matraz receptor durante 1 minuto. y valorar con 0,01 mol en el punto final hasta obtener color gris o azul violeta. Llame a una solución estándar de HCl de 0,05 mol 1. Absorba 10 mI_ al mismo tiempo y opere la solución de digestión del blanco de reactivo de acuerdo con ③. 5. Cuente 6. Nota: ① La muestra seca se pesa con papel de pesaje y se digiere con papel. El tubo en blanco también se digiere con papel de pesaje. ② Es probable que las muestras con alto contenido de azúcar y aceite se desborden durante la digestión y deben calentarse lentamente. ③Se puede determinar si el amoníaco está completamente destilado utilizando un papel de prueba de pH para detectar si el destilado es alcalino. (4) Antes del experimento, se deben revisar cuidadosamente todas las juntas del dispositivo de destilación para garantizar que no haya fugas de aire. La manguera de goma y el tapón utilizados deben empaparse en hidróxido de sodio (10) y hervirse durante 10 minutos, luego lavarse con agua, hervirse con agua y luego lavarse con agua. ⑤Agregue la muestra con cuidado para evitar contaminar la boca y el cuello de la botella del método Kjeldahl.